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elisa試劑盒的主要檢測條件有哪些?

更新時間:2022-05-16點擊次數(shù):741
   elisa試劑盒常用的方法有雙抗體夾心法、間接法、競爭法以及BAS-ELISA等。該試劑盒的專一性強,抗原與抗體的免疫反應是專一反應,而免疫酶技術以免疫反應為基礎,所檢測的對象是抗原(或抗體),使用的抗體除標記了酶以外,與普通抗體的免疫反應特性并無多大差別。
  elisa試劑盒主要檢測條件如下:
  1.elisa加樣
  elisa一般有3次加樣步聚,即加標本→加酶結合物→加底物。凍結血清融解后,蛋白質局部濃縮,分布不均,應充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下倒置混和,不要在混勻器上強烈振蕩。制備血漿標本需借助于抗凝劑,而血清標本只要待血清天然凝固、待其收縮后即可取得。也可在板孔中加入稀釋液,再在其加入血清標本,然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。
  一般說來,5天內(nèi)測定的血清標本可放置于4℃,超過一周測定的需低溫冰存??捎米鱡lisa測定的標本十分廣泛,體液、分泌物和排泄物等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份,elisa試劑盒中本次試驗不需用的部分應及時放回冰箱保留。
  2.固相載體
  加酶結合物應用液和底物用液時可用定量多道加液器,使加液過程迅速完成。如有細菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會產(chǎn)生假陽性反應。每次加標本應更換吸嘴,以發(fā)生交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加樣。
  好的儀器和準確的操縱是保證elisa試劑盒檢測結果正確可靠的必要條件。elisa頂用的蒸餾水或去離子水,包括用于洗滌的,應為新鮮的和高質量的。有些標本可直接進行測定,有些則需經(jīng)預處理。
  3.標本因素
  血清標本可按常規(guī)方法采集,應留意避免溶血,紅細胞溶解時會開釋出具有過氧化物酶活性的物質,以HRP為標記的elisa測定中,溶血標本可能會增加非特異性顯色。如在冰箱中保留過久,其中的可發(fā)生聚合,在間接法elisa中可使本底加深。

TEL:021-61210612

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